摘要：利用高效液相示差折光分析法測定D-氨基葡萄糖鹽酸鹽中的N-乙酰-D-氨基葡萄糖，方法采用Alltech C18柱(250× 4.6 mm,5μm),流動相為乙腈-醋酸鹽緩沖液(3∶97)，流速1 mL /min,柱溫40℃ ，進樣量20μL.N-乙酰-D-氨基葡萄糖在4.18～ 1 079.33μg mL范圍內呈顯著的線性關系，相關系數(shù)為0.9993，方法的加標回收率98.78%，檢出限4.18μg mL。

關鍵詞:HPLC，D-氨基葡萄糖鹽酸鹽， N-乙酰-D-氨基葡萄糖。

D-氨基葡萄糖鹽酸鹽(C6H11O5NH2·HCl)(D-Glucosamine Hydrochloride)，是一種海洋生物制劑,在人體內具有重要的生理意義：參與肝腎解毒，具有抗炎保肝等作用，在醫(yī)藥上用于風濕性關節(jié)炎癥和胃潰瘍疾病^[1]，同時也是食品甜味劑,抗氧劑,又是雙歧桿菌培養(yǎng)基的主要成分之一；在制備D-氨基葡萄糖鹽酸鹽的過程中,容易產生雜質N-乙酰-D-氨基葡萄糖，所以為了對D-氨基葡萄糖鹽酸鹽的質量進行控制，建立了檢測N-乙酰-D-氨基葡萄糖雜質的方法。目前已有HPLC示差折光分析法測定糖類物質的文獻^{[2～ 3]}，但還未見測定N-乙酰-D-氨基葡萄糖的報道，由于D-氨基葡萄糖鹽酸鹽和N-乙酰-D-氨基葡萄糖均無紫外吸收，結合本實驗室情況,本實驗采用HPLC-RID法檢測，該方法快速、靈敏,結果準確可靠，為D-氨基葡萄糖鹽酸鹽的純度檢測提供了依據(jù)。

1 實驗部分

1.1 儀器與設備

日本島津LC-6A型高效液相色譜儀；RID-6A示差折光檢測器；KQ-500DB型數(shù)控超聲波清洗器。

1.2 試劑

乙腈（色譜純）；水為超純水；N-乙酰-D-氨基葡萄糖標準品。

醋酸鹽緩沖液：稱取0.80g醋酸鈉和0.98g正庚烷磺酸鈉，加入970ml水溶解，用冰醋酸調節(jié)PH至4.5。

2 實驗方法

2.1 色譜條件

C18色譜準（250x4.6mm,5μm），流動相為乙腈-醋酸鹽緩沖液（3：97），流速1ml/min，柱溫：40℃，進樣體積為20μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 標準品溶液的制備

精取122.88 mg N-乙酰-D-氨基葡萄糖于25 mL容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，搖勻得4.915 2 mg/mL。

2.2.2 樣品溶液的制備

稱取50mg樣品，置于25ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，搖勻，超聲5min，過0.45μm濾膜，即得。

2.3 系統(tǒng)適應性實驗

取標準品溶液（a)，空白溶液(b)，樣品溶液(c)，各20μL注入色譜儀，記錄色譜圖如下：